アストロサイト

ヒトiPS細胞を目的の細胞タイプに分化させるには、長い時間と労力が必要であり、iPS細胞由来の分化細胞を用いた研究における大きな課題の1つとなっています。

当社独自の Quick-Tissue™技術  では、簡便な操作のみでヒトiPS細胞から高純度なアストロサイトを高速かつ再現性よく分化させることができます。

ヒトiPS細胞由来アストロサイト

アストロサイト分化誘導キット

特長

  • 約1ヶ月で分化が可能
  • 機能性は検証済
  • ゲノムに影響なし(フットプリントフリー)
  • 分化試薬キットまたは分化細胞から選択可
  • 複数のドナーや疾患タイプの分化細胞が利用可能

キャラクタライゼーション

分化誘導キット

ワークフロー

Quick-Glia Astrocyte - SeV Kit で誘導開始後1, 2, 3, 6, 9, 14, 21, 日目の代表的な位相差画像(スケールバー=100μm)。

ヒトiPS細胞由来アストロサイト(凍結細胞)

ワークフロー

Quick-Glia™ Astrocyteの免疫染色

Quick-Glia™ Astrocyteの免疫染色では、アストロサイトマーカー CD44, ALDH1L1, and GFAPの発現が見られました(スケールバー=100μm)。核はHoechst 33342 (cyan)で対比染色しており、画像は疑似カラーで撮影しています。

(A)ヒト初代アストロサイト(HPA)と未分化iPS細胞(左)、及びHPAと分化誘導後28日目のQuick-Glia™ - Astrocyte(右)の遺伝子発現プロファイル

誘導開始後28日目のQuick-Glia™ - Astrocyteと未分化iPS細胞の遺伝子発現をそれぞれヒト初代アストロサイト(ScienCell  Catalog Number: 1800-5)の遺伝子発現と比較した散布図を示します。遺伝子発現のレベルは、log10スケールの100万あたりの転写産物(TPM)に基づいており、HPAと比較して統計的に有意性のある高発現な遺伝子は青色のドット、低発現な遺伝子は緑色のドットで示しています。誘導開始後28日目のQuick-Glia™ - Astrocyte(右)では、プロットが収束しばらつきが減少していることから、HPAに近い遺伝子発現パターンとなっています。

 

(B) ヒト初代アストロサイト(HPA)とiPS細胞由来Quick-Glia™ – Astrocyteの遺伝子発現プロファイルを比較した際の相関係数

縦軸は中央値を差し引いたlogTPMに基づくピアソン相関(r)を示します。誘導開始後14、28、42日と経過するにつれてHPAとiPS細胞由来Quick-Glia™ - Astrocyteの遺伝子発現プロファイルの相関が強くなっています。

リアルタイムPCRによるアストロサイト関連遺伝子CD44、GFAP、S100β、ALDH1L1の発現解析

誘導開始後28日目(A)と42日目(B)のQuick-Glia™ – Astrocyte とヒト脳のtotal RNA (TaKaRa, Catalog Number: 636530)での発現量を比較しました。

ホスホグリセリン酸キナーゼ1(PGK1)発現量で正規化し、未分化のヒトiPS細胞をコントロールとして比較した相対的な遺伝子発現を示しています。エラーバーは標準偏差を示します。

グルタミン酸取り込み評価

ヒト初代アストロサイト(ScienCell Research Laboratories, Catalog number: 1800)と誘導開始後28または48日目で回収したQuick-Glia - Astrocyteをアストロサイト培地 (ScienCell Research Laboratories, without FBS, Catalog number: 1801)で14日間培養しました。ネガティブコントロールとして、アッセイの2日前に、StemFit Basic04 medium (Ajinomoto, Catalog number: ASB04-C) で培養したヒトiPS細胞を同条件で播種しました。

細胞に100µM L-グルタミン酸 (Tocris, Catalog number: 0218)を添加したHBSS(フェノールレッド不含)を60分間曝露した後すぐに回収し、生物発光ベースのグルタミン酸-Gloアッセイキット(Promega, Catalog number: J7021) でグルタミン酸濃度を測定しました。取り込まれたグルタミン酸の量を決定するため、培地のみでのバックグラウンドのシグナルを差し引き、グルタミン酸滴定曲線から濃度を取得しました。

アストロサイト分化誘導キット

Quick-Neuron™ Astrocyte- SeV Kits (small サイズとlargeサイズがございます) では、お手持ちのiPS/ES細胞株を高速、簡単、かつ効率的にアストロサイトへ分化させることができます。 このキットでは、分化を誘導するための弊社独自の転写因子カクテルを温度感受性センダイウイルスで導入するため、フットプリントフリーで、つまりゲノムに影響を与えずに目的の細胞へと分化させることが可能です。

Cat No. Product Name Disease StatusDescription
AS-SeV Quick-Glia™ Astrocyte - SeV Kit Kit for differentiation of human iPS/ES cells into astrocytes in 28 days using Sendai virus.

ヒトiPS細胞由来アストロサイト

当社のQuick-Glia™ Astrocyte - Human iPSC-derived Astrocyteは、カリフォルニア再生医療機構(CIRM, California Institute for Regenerative Medicine )とのライセンス契約に基づき、CIRM保有のヒトiPS細胞株を使用して生産および販売しております。

CIRMのiPS細胞バンクには1,500以上のiPS細胞株が登録されていますので、特定のドナー細胞株由来のアストロサイトをご希望の場合はお問い合わせください。当社が提供するアストロサイトはすべて当社独自の転写因子ベースの技術を用いて分化させており、「フットプリントフリー」で機能的かつ高品質な細胞です。

Cat No. Product Name Disease StatusDescription
AS-SeV-CW50065 Quick-Glia™ Astrocytes - Human iPSC-derived Astrocytes (F, 74 yr donor) - Healthy Control Healthy Control Cryopreserved human iPSC-derived astrocytes from healthy control (F, 74)
AS-SeV-CW70067 Quick-Glia™ Astrocytes - Human iPSC-derived Astrocytes (F, 21 yr donor) - Healthy Control Healthy Control Cryopreserved human iPSC-derived astrocytes from healthy control (F, 21)
AS-SeV-CW50023 Quick-Glia™ Astrocytes - Human iPSC-derived Astrocytes (M, 69 yr donor) - Healthy Control Healthy Control Cryopreserved human iPSC-derived astrocytes from healthy control (M, 69)
AS-SeV-CW10149 Quick-Glia™ Astrocytes - Human iPSC-derived Astrocytes (M, 38 yr donor) - Healthy Control Healthy Control Cryopreserved human iPSC-derived astrocytes from healthy control (M, 38)
AS-SeV-CW20300 Quick-Glia™ Astrocytes - Human iPSC-derived Astrocytes (M, 10 yr donor) - Healthy Control Healthy Control Cryopreserved human iPSC-derived astrocytes from healthy control (M, 10)
AS-SeV-CW50025 Quick-Glia™ Astrocytes - Human iPSC-derived Astrocytes (F, 68 yr donor) - Alzheimer's Disease Alzheimer's Disease Cryopreserved human iPSC-derived astrocytes from Alzheimer's Disease patient (F, 68)
AS-SeV-CW50113 Quick-Glia™ Astrocytes - Human iPSC-derived Astrocytes (M, 68 yr donor) - Alzheimer's Disease Alzheimer's Disease Cryopreserved human iPSC-derived astrocytes from Alzheimer's Disease patient (M, 68)
AS-SeV-CW50114 Quick-Glia™ Astrocytes - Human iPSC-derived Astrocytes (F, 72 yr donor) - Alzheimer's Disease Alzheimer's Disease Cryopreserved human iPSC-derived astrocytes from Alzheimer's Disease patient (F, 72)
AS-SeV-CW50115 Quick-Glia™ Astrocytes - Human iPSC-derived Astrocytes (F, 67 yr donor) - Alzheimer's Disease Alzheimer's Disease Cryopreserved human iPSC-derived astrocytes from Alzheimer's Disease patient (F, 67)
AS-SeV-CW50137 Quick-Glia™ Astrocytes - Human iPSC-derived Astrocytes (F, 70 yr donor) - Alzheimer's Disease Alzheimer's Disease Cryopreserved human iPSC-derived astrocytes from Alzheimer's Disease patient (F, 70)
AS-SeV-CW50147 Quick-Glia™ Astrocytes - Human iPSC-derived Astrocytes (M, 71 yr donor) - Alzheimer's Disease Alzheimer's Disease Cryopreserved human iPSC-derived astrocytes from Alzheimer's Disease patient (M, 71)
AS-SeV-CW50104 Quick-Glia™ Astrocytes - Human iPSC-derived Astrocytes (M, 79 yr donor) - Alzheimer's Disease Alzheimer's Disease Cryopreserved human iPSC-derived astrocytes from Alzheimer's Disease patient (M, 79)
AS-SeV-CW50107 Quick-Glia™ Astrocytes - Human iPSC-derived Astrocytes (M, 72 yr donor) - Alzheimer's Disease Alzheimer's Disease Cryopreserved human iPSC-derived astrocytes from Alzheimer's Disease patient (M, 72)
AS-SeV-CW50169 Quick-Glia™ Astrocytes - Human iPSC-derived Astrocytes (F, 68 yr donor) - Alzheimer's Disease Alzheimer's Disease Cryopreserved human iPSC-derived astrocytes from Alzheimer's Disease patient (F, 68)
AS-SeV-CW50170 Quick-Glia™ Astrocytes - Human iPSC-derived Astrocytes (F, 64 yr donor) - Alzheimer's Disease Alzheimer's Disease Cryopreserved human iPSC-derived astrocytes from Alzheimer's Disease patient (F, 64)
AS-SeV-CW50173 Quick-Glia™ Astrocytes - Human iPSC-derived Astrocytes (F, 74 yr donor) - Alzheimer's Disease Alzheimer's Disease Cryopreserved human iPSC-derived astrocytes from Alzheimer's Disease patient (F, 74)
AS-SeV-CW50174 Quick-Glia™ Astrocytes - Human iPSC-derived Astrocytes (F, 76 yr donor) - Alzheimer's Disease Alzheimer's Disease Cryopreserved human iPSC-derived astrocytes from Alzheimer's Disease patient (F, 76)
AS-SeV-CW50175 Quick-Glia™ Astrocytes - Human iPSC-derived Astrocytes (F, 77 yr donor) - Alzheimer's Disease Alzheimer's Disease Cryopreserved human iPSC-derived astrocytes from Alzheimer's Disease patient (F, 77)
AS-SeV-CW50176 Quick-Glia™ Astrocytes - Human iPSC-derived Astrocytes (M, 74 yr donor) - Alzheimer's Disease Alzheimer's Disease Cryopreserved human iPSC-derived astrocytes from Alzheimer's Disease patient (M, 74)
AS-SeV-CW50177 Quick-Glia™ Astrocytes - Human iPSC-derived Astrocytes (F, 85 yr donor) - Alzheimer's Disease Alzheimer's Disease Cryopreserved human iPSC-derived astrocytes from Alzheimer's Disease patient (F, 85)
AS-SeV-CW60130 Quick-Glia™ Astrocytes - Human iPSC-derived Astrocytes (F, 6 yr donor) - Epilepsy Epilepsy Cryopreserved human iPSC-derived astrocytes from Epilepsy patient (F, 6)
AS-SeV-CW60231 Quick-Glia™ Astrocytes - Human iPSC-derived Astrocytes (M, 6 yr donor) - Epilepsy Epilepsy Cryopreserved human iPSC-derived astrocytes from Epilepsy patient (M, 6)
AS-SeV-CW60236 Quick-Glia™ Astrocytes - Human iPSC-derived Astrocytes (F, 11 yr donor) - Epilepsy Epilepsy Cryopreserved human iPSC-derived astrocytes from Epilepsy patient (F, 11)
AS-SeV-CW20026 Quick-Glia™ Astrocytes - Human iPSC-derived Astrocytes (M, 10 yr donor) - Autism Spectrum Disorder Autism Spectrum Disorder Cryopreserved human iPSC-derived astrocytes from Autism Spectrum Disorder patient (M, 10)
AS-SeV-CW20090 Quick-Glia™ Astrocytes - Human iPSC-derived Astrocytes (F, 18 yr donor) - Autism Spectrum Disorder Autism Spectrum Disorder Cryopreserved human iPSC-derived astrocytes from Autism Spectrum Disorder patient (F, 18)
AS-SeV-CW10130 Quick-Glia™ Astrocytes - Human iPSC-derived Astrocytes (M, 36 yr donor) - Fatty Liver Disease Fatty Liver Disease Cryopreserved human iPSC-derived astrocytes from Fatty Liver Disease patient (M, 36)

よくあるご質問

エリクサジェン・サイエンティフィック社の分化細胞および分化誘導試薬キットを使用するには、ライセンスが必要ですか?

ヒトへの使用や治療・診断目的での使用を除き、エリクサジェン・サイエンティフィック社の分化細胞および分化誘導試薬キットを使用する際に第三者からの追加ライセンスは不要です。

詳細についてはour license statement をご確認ください。

Quick-Glia™ Astrocytes - Human iPSC-derived Astrocytes にはどのようなサイズがありますか?

Smallサイズ(>1 million viable cryopreserved cells) とLargeサイズ(5x >1 million viable cryopreserved cells)をご用意しております。

更に多くの数量をご希望の場合はお問い合わせください

Quick-Glia™ differentiation kits にはどのようなサイズがありますか?

SmallサイズとLargeサイズをご用意しております。Smallサイズは24ウェルプレートの4ウェル分に使用できる試薬セットで、シングルセル解析、イメージング解析、パイロットスタディなどに最適です。

Largeサイズは6ウェルプレート6ウェル分または10cmディッシュ1枚分に使用できる試薬セットで、ハイスループットスクリーニングやRNAシーケンシングなどのアプリケーションなどに最適です。

更に多くの数量をご希望の場合はお問い合わせください。