よくあるご質問
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一般的なご質問
Quick-Tissue™技術は、ゲノムの遺伝子を改変しますか？
Quick-Tissue™技術で使用されるセンダイウイルス（SeV）はRNAウイルスですので、ゲノムDNAに組み込まれることはありません。、原則として、RNAとして細胞に導入された外来遺伝子は、またmRNAで導入された場合でも、DNAと違い細胞核内に入り込む必要がなく、すぐさま翻訳され発現されます。よって、ゲノム上の遺伝子を変異させることはありません。これは以下の総説で論じられています。Yamamoto, et al. (2009) "Current prospects for mRNA gene delivery." Eur. Eur.J. Pharm Biopharm 71, 484-489.
分化後もSeVは活性を維持しますか？
いいえ、当社のキットで使用しているSeVは温度感受性変異体であり、ユーザーガイドにありますように33℃で活性化し、37℃で不活化します。
センダイウイルス（SeV）は危険ですか？
SeVはヒトに対する病原性はなく（ヒトはこのウイルスの自然宿主ではない）、免疫力のある動物では感染が持続しません。さらに、当社のキットで使用しているSeVは、宿主としてヒト多能性幹細胞に導入しても感染性のウイルス粒子を生成せず、また33℃では活性化していますが37℃では不活性化する温度感受性の変異体です。ただし、SeVはエアロゾルや呼吸器分泌物との接触により感染する可能性があり、また感染力も強力です。そのため、ウイルスが粘膜に付着しないように適切な配慮が必要です。当社のSeVを用いたキットは、安全キャビネットまたはクリーンベンチを用いたバイオセーフティーレベル2（BSL-2）の封じ込め下で、適切な個人用保護具を用いて使用する必要があります。万が一、ウイルスが皮膚や目に接触した場合は、多量の水で洗い流して患部を除染し、所属機関のバイオセーフティ委員会の承認を得た安全マニュアルに従って処置ください。
エリクサジェン・サイエンティフィック製品の使用にはライセンス契約が必要ですか？
いいえ。当社の分化キットやiPS細胞由来分化細胞を使用するのに、追加ライセンスやMTA（Material Transfer Agreement）は必要ありません。ただし、これらの製品は研究用に限ります。
一方、mRNAのCDMOサービスについては個別の案件で異なりますので、問い合わせください。
分化誘導にはどのような転写因子が使われていますか？
当社独自に発見した情報を含むため、知的財産権の保護対象となります。申し訳ございませんが開示することはできません。
操作に関するご質問/トラブルシューティング
キットを使用する前に、どのくらいの期間、hiPS細胞を維持する必要がありますか？
分化を開始する前の細胞は、典型的なhiPS細胞の形態（細胞質領域が小さく、細胞が密に詰まった丸いコロニー）を示し、自発的に分化する細胞が少なく、正常な増殖率（例：1日2倍になる）で安定して培養されている必要があります。そのため、分化させる前に凍結ストックから融解後少なくとも14日間は培養し、培養中は80％以上のコンフルエントに達しないように適宜継代を行ってください。
分化キットでは、なぜhiPS細胞をStemFitやStemFlexの条件で維持する必要があるのですか？
hiPS細胞は、分化の前にシングルセルでの継代に適応する必要があります。当社のプロトコルはStemFit/StemFlexでのみテストされていますので、他のiPS細胞用培地での結果を保証することができません。
Solution D1処理だけでは細胞が剥離できず、スクレイピングが必要なのですが、なぜですか？
ディッシュ/ウェルのコーティングに使用した基質の濃度が高すぎると、Solution D1の処理で細胞を剥離するために10分以上（最大20分まで）のインキュベーションが必要になります。次回からは、コーティング基質の濃度を50〜70%に下げてください。
hiPS細胞を回収した後、凝集塊がたくさんできるのはなぜですか？
hiPS細胞を回収した後、細胞をチューブ内に5分以上放置させないでください。それ以上放置すると細胞の塊ができる原因になります。細胞塊の形成はセンダイウイルスの感染の妨げになることがあります。感染にはシングルセルが最適です。
GeltrexやMatrigelをhPSC培養のコーティング基材として使用できますか？
当社のキットはこれらの基質に最適化されていません。ただし、ご使用のhiPS細胞の分化プロトコルがすでにそれらの基質に最適化されている場合は、当社の保証外使用になりますが当社のキットと併用していただくことは可能です。
